自從發(fā)現(xiàn)生物抗菌肽以來,已對生物抗菌肽的作用機理進行了大量研究。目前已知的是,生物抗菌肽是通過作用于細菌細胞膜而起作用的,在此基礎(chǔ)上,提出了多種生物抗菌肽與細胞膜作用的模型。但嚴格地說,生物抗菌肽以何種機制殺死細菌至今還沒有*弄清楚。
目前一般認為,Cecropin類生物抗菌肽作用于細胞膜,在膜上形成跨膜的離子通道,破壞了膜的完整性,造成細胞內(nèi)容物泄漏,從而殺死細胞。
對于生物抗菌肽破壞膜的完整性,使細胞內(nèi)外屏障喪失,從而殺死細菌這一觀點已得到基本統(tǒng)一的認識,但對其具體作用過程、是否存在特異性的膜受體、有無其它因子協(xié)同等問題尚不十分清楚,存在不同看法。不同生物抗菌肽的作用機制可能不一樣,尚有待進一步研究
生物生物抗菌的基因工程
生物生物抗菌肽在動物體內(nèi)含量極微。從動物體內(nèi)提取生物抗菌肽產(chǎn)量低、費時長、工藝復(fù)雜、費用昂貴,無法實現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn),這成為制約生物抗菌肽進入實際應(yīng)用的zui大障礙。因此,開展生物抗菌肽基因工程研究具有重要意義。
目前,已進入臨床應(yīng)用的基因工程藥物多數(shù)是采用原核表達系統(tǒng)生產(chǎn)的,但由于生物抗菌肽對細菌的殺傷作用,不能用原核表達系統(tǒng)直接表達具有生物活性的生物抗菌肽,而如果采用融合蛋白的形式表達,將給表達產(chǎn)物的后處理帶來很大麻煩。因此,國內(nèi)外的研究者多采用真核表達系統(tǒng)進行生物抗菌肽基因工程研究。
近年來,以酵母為基因工程受體菌的研究引起人們的重視,酵母具有比大腸桿菌更完備的基因表達調(diào)控機制和對表達產(chǎn)物的加工修飾及分泌能力,并且不會產(chǎn)生內(nèi)毒素,是基因工程中良好的真核基因受體菌。自1978年Hinnen等首先試驗酵母轉(zhuǎn)化成功后,已有人干擾素基因、乙型肝炎表面抗原基因、α-淀粉酶基因等數(shù)十種外源基因在酵母中獲得表達。國內(nèi)研究者大量研究表明,利用酵母表達生物抗菌肽是一條可行的道路,如能在表達產(chǎn)率上得到進一步提高,將為生物抗菌肽早日進入臨床應(yīng)用奠定良好的基礎(chǔ)。
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